【产品名称】
Chromogranin A 抗体试剂（免疫组织化学）
【包装规格】
0.1ml/支，1ml/支，1.5ml/支，3ml/支，6ml/支，10ml/支，17ml/支，20ml/支
【预期用途】
在常规染色（如：HE染色）基础上进行免疫组织化学染色，为医师提供诊断的辅助信息。
【检验原理】
免疫组化，是基于免疫学基本原理，在光学显微镜的水平上利用抗体特异结合，对组织或细胞内的特异性抗原进行定位的一种方法。
根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AKP）、荧光素等的二抗进行反应，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。
【主要组成成分】
鼠抗人 Chromogranin A 单克隆抗体(亚型： IgG1 Kappa；克隆号：LK2H10)、抗体稀释液。
【储存条件及有效期】
冷藏（2-8℃）保存。有效期1年。生产日期等其他内容详见标签。
【适用仪器】
光学显微镜、免疫组化分析仪。
【样本要求】
1. 福尔马林固定的石蜡包埋组织的切片；
2. 丙酮固定的冷冻切片或固定的细胞涂片。
【检验方法】
具体步骤：
1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 蒸馏水冲洗，PBS（pH7.4）浸泡5分钟，抗原修复可在此步后进行（可用微波、高压或酶修复方法，自然冷却）。
3. 3%过氧化氢溶液（试剂1）室温孵育5~10分钟，以灭活内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗，2分钟×3次。
4. 滴加Chromogranin A 抗体试剂，37℃孵育1~2小时或4℃过夜（最好复温）。PBS冲洗，2分钟×3次。
5. 滴加通用型多聚辣根酶标记的抗小鼠/抗兔二抗（试剂2），室温或37℃孵育20~30分钟，PBS或TBS冲洗， 2分钟×3次。
6. 滴加DAB，（滴加前先将DAB浓缩液（试剂3）用DAB稀释液（试剂4）按1:20稀释，现用现配），显色时间：室温3-5分钟。
7. 自来水充分冲洗，复染，脱水透明（如需要）、封片。用DAB显色，切片经过梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。在光学显微镜下观察得出结果。如有棕色生成物为阳性，没有棕色生成物为阴性。
【检验结果的解释】
常见问题及可能引起的原因：
1. 正常情况下带检查的细胞着色了，就是阳性；不着色就是阴性。阳性组织切片上无染色结果 可能原因：染色步骤不正确；忘记滴加和孵育一抗或者二抗；在染色过程中样品组织切片脱水干片；没有进行必要的抗原热（或者蛋白酶）修复，或者抗原修复不充分；抗原表达量过低等等原因。
2. 所有的组织切片染色结果很弱 可能原因：一抗浓度太低，孵育时间太短；组织过度固定或者处理得不好；抗原表达量过低；显色色原准备不当；等等；
3. 非特异性背景染色或者高背景染色 可能原因：内源性酶活性没有进行适当的封闭；脱蜡不充分；组织切片的冲洗不充分；在组织切片的孵育和染色过程中片子脱水干片了；需要不同的封闭剂；显色剂反应时间过长；组织连接剂过量使用等等；
4. 阴性组织对照片上染色结果阳性 可能原因：二抗试剂中可能含有会交叉反应的试剂；内源性过氧化物酶没有充分封闭；组织中含有内源性色原；组织中有内源性生物素等等。
【检验方法的局限性】
本试剂盒为定性试验，只能对结果做阴性或阳性的判别。
【产品性能指标】
1. 外观：试剂盒外观：整洁，文字符号标识清晰； 包装完整，无破损；内包装瓶密封、无破损、无泄漏；无色透明液体。
2. 装量 产品装量不得低于标示装量。
3. 准确性 对已知阳性样本，用本试剂检测10次，结果均为阳性。
4. 重复性 对已知阳性样本，用本试剂同一批号试剂盒测试10次，结果均为阳性；对已知阳性样本，三个不同批号试剂盒分别测试5次，结果均为阳性。
5. 特异性 对阴性对照检测10次，结果均为阴性。
6. 稳定性 长期稳定性试验证明该试剂可在2~8℃稳定存放1年。
【注意事项】
1. 穿戴合适的个人防护装置，以避免接触眼睛与皮肤。出于个人安全考虑，在处理具有潜在感染性的样品（如肝炎、HIV等）时，请使用一次性手套，并在生物安全柜中进行操作。
2. DAB是已知可能致癌物，在使用过程中，应穿上工作服，戴上手套，在通风橱中进行操作。请勿将试剂沾染到皮肤、眼睛或衣物上。一旦发生以上情况，应立即用大量的水冲洗。3.根据当地政府、国家或联邦的规范要求，对未使用的溶液进行处理。
3. .固定方式和时间、组织切片厚度、抗原修复方式、一抗稀释度和孵育时间等方面的因素都会对结果产生影响，在对实验结果进行分析时使用者应该充分考虑上述因素。
4. 为防止可能出现的假阳性、假阴性结果，建议在实验过程设置对照, 包括阳性组织对照、试剂对照和阴性组织对照。
5. 本试剂仅适合人体组织免疫组化染色研究使用，其它种属组织请另行咨询。
6. 请勿将将本公司的抗体、检测试剂盒与其他公司的试剂混合使用，请勿使用过期的试剂盒，不同批号间试剂盒也不能交叉混用。
【标识的解释】
【参考文献】
1. 张文学主编.2007.《免疫学实验技术》北京.科学出版社。
2. 唐秋艳、王云龙、陈兴业主编. 《免疫诊断试剂实用技术》2009.北京. 海洋出版社。
3. David J. Dabbs主编. 周庚寅、霍启辉、张庆慧主译. 《诊断免疫组织化学》 2008年 北京.北京大学医学出版社。
4. 陈罡, 罗殿中, 李萍,等. 浅谈免疫组织化学中的显色问题[J]. 实用医院临床杂志,2004, 1(4):90-90。
【基本信息】
备案人名称：滴嘉生物技术（安徽）有限公司
住所：安徽省淮南市山南高新区科技企业孵化器3号楼3层
联系方式：18610159957 电话：0554-6661120 传真：0554-6661120
售后服务单位名称：滴嘉生物技术（安徽）有限公司
联系方式：0554-6661120
代生产企业名称：源量生物技术（安徽）有限公司
生产地址：安徽省淮南市山南高新区科技企业孵化器3号楼4层
【生产备案凭证编号】
皖南药监械生产备20220004号
【医疗器械备案凭证编号/产品技术要求编号】
皖南械备
【说明书核准日期及修改日期】
修改日期：2023.08.18 核准日期：2023.08.18